為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光，用LUYOR-3415RG觀測(cè)看不到？

1.為什么熒光顯微鏡能觀察到熒光，用LUYOR-3415RG觀測(cè)看不到？

因?yàn)橛行┲踩氲?span style="font-weight: bolder;">熒光蛋白不是整體表達(dá)，只是局部表達(dá)，表達(dá)的面積太小，人的肉眼無(wú)法識(shí)別，而熒光顯微鏡是在放大幾十倍甚至上百倍觀察的效果。

2.為什么按照LUYOR-3415說(shuō)明書操作卻看不到熒光的表達(dá)

 原因是GFP激發(fā)光源沒(méi)有選擇正確，比如載體標(biāo)注的熒光蛋白應(yīng)該在488nm下激發(fā)出熒光，但是卻選擇了540nm或者365nm的激發(fā)光源去激發(fā)熒光蛋白，這種情況是看不到熒光蛋白的。可以根據(jù)LUYOR-3415 GFP激發(fā)光源介紹或者聯(lián)系客服小姐姐進(jìn)行咨詢?cè)龠x擇。

 3.為什么波段選擇是正確的還看不到熒光表達(dá)？

除了表達(dá)量少以外，很有可能是實(shí)驗(yàn)的操作失誤，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，因此看不到熒光，可以選擇其他的陽(yáng)性質(zhì)粒進(jìn)行檢測(cè)儀器效果。

4.為什么說(shuō)載體表達(dá)量低會(huì)導(dǎo)致看不到熒光蛋白？是不是表達(dá)量低的熒光蛋白都會(huì)看不見熒光？

大家都知道肉眼的可視范圍是有限的，比如只能看見籃球大小的物體，這時(shí)我們的載體表達(dá)量只有乒乓球大小就會(huì)導(dǎo)致看不見。并不是的表達(dá)量低都看不見熒光表達(dá)，只有低于人眼可視范圍的表達(dá)量才會(huì)導(dǎo)致看不見熒光的表達(dá)。這時(shí)可以借助普通的顯微鏡加上LUYOR-3415組合成熒光顯微鏡進(jìn)行觀察。

5.LUYOR-3415RG如何切換光源？

切換光源可在儀器頭部后方圓形按鈕處，輕輕按下按鈕即可輕松切換光源

 6.植入到葉片的熒光蛋白為什么無(wú)法觀察到？

因剛剛植入進(jìn)去不久，表達(dá)位置太小，肉眼無(wú)法識(shí)別。特別是在組培繁殖研究經(jīng)常遇到此問(wèn)題。

7.用LUYOR-3415熒光蛋白觀測(cè)鏡無(wú)法分選含有GFP的種子

因?yàn)橐话惴N子表皮都有堅(jiān)硬的外殼，很多種子外殼上沒(méi)有表達(dá)GFP，隔著外殼很難去分選種子。

8.為什么老鼠早期可以看到熒光蛋白后期就很難看得到？

剛出生的轉(zhuǎn)基因老鼠皮膚比較薄，毛發(fā)少，很容易觀察到GFP,在生長(zhǎng)一段時(shí)間在表皮就很難看得到。 

 9.觀察到的GFP效果如何拍照？

如果用單反相機(jī)拍照，請(qǐng)購(gòu)買專用的拍照濾鏡，把相機(jī)調(diào)試到合適的拍照模式（不同品牌的相機(jī)拍照模式不一樣），我公司提供62mm的單反相機(jī)專用拍照濾鏡，可以單獨(dú)購(gòu)買。

 10.購(gòu)買的62mm相機(jī)濾鏡和照相機(jī)不配套怎么辦？

請(qǐng)先識(shí)別自己相機(jī)鏡頭尺寸，正視相機(jī)前端，上面一般會(huì)標(biāo)識(shí)XXmm，例如：58mm，67mm等，如果是58mm的鏡頭，請(qǐng)購(gòu)買62轉(zhuǎn)58mm的轉(zhuǎn)換卡，通過(guò)轉(zhuǎn)換卡可以將62mm的濾鏡安裝到58mm鏡頭上。我公司提供部分常規(guī)尺寸的轉(zhuǎn)換卡，常規(guī)的轉(zhuǎn)換卡也可以向我公司技術(shù)人員免費(fèi)索取。 

11. 路陽(yáng)的熒光蛋白激發(fā)光源有什么優(yōu)點(diǎn)？

Luyor-3415采用了雙通道構(gòu)造，一臺(tái)即可實(shí)現(xiàn)多種熒光蛋白的觀察，比如：GFP,RFP,YFP,CFP等，且光源照射面積廣激發(fā)面積大，2x6顆大燈柱，激發(fā)出的熒光明亮，容易觀察且清晰。

12.用于種子熒光蛋白篩選，用哪一個(gè)型號(hào)比較好？

如果長(zhǎng)時(shí)間用于種子篩選，建議購(gòu)買LUYOR-3415RG，這款可以用交流適配器供電也可用鋰電池供電，可選配支架進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間工作。 

13.路陽(yáng)的熒光蛋白觀測(cè)鏡都有哪些用戶？

中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、中山大學(xué)、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，中國(guó)農(nóng)科院、中科院遺傳所等，目前有100多家科研單位在使用。

14.LUYOR產(chǎn)品可以試用嗎？

luyor熒光蛋白觀測(cè)鏡可以試用，試用產(chǎn)品為友情提供，為了讓更多需要篩選的實(shí)驗(yàn)室研究人員了解到它，得到使用，希望大家多多愛(ài)護(hù)。

15.為什么別的廠家的熒光蛋白觀察眼鏡和luyor的激發(fā)光源不匹配？

我們的觀察眼鏡和激發(fā)光源是經(jīng)過(guò)我們工程師調(diào)配好的，不僅能夠阻隔掉激發(fā)光，同時(shí)又能保證發(fā)射的熒光能夠更多的觀察到。

16.觀察眼鏡可以多買嗎？

因我們一種光源標(biāo)配是一副眼鏡，需要多配觀察眼鏡的請(qǐng)直接聯(lián)系我們銷售和當(dāng)?shù)卮砩藤?gòu)買。

17.如果需要長(zhǎng)時(shí)間使用激發(fā)光源進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的操作，是不是需要一直用手舉著儀器？還是有什么解決方法？

可以選取3415專用支架，支架為可調(diào)支架，如果長(zhǎng)時(shí)間用燈的話，可調(diào)支架可以解放雙手。

18.產(chǎn)品保修多久？
我們主機(jī)是免費(fèi)保修3年，充電電池組免費(fèi)保修1年。
若有其他問(wèn)題需要咨詢，可掃描下方二維碼聯(lián)系上海路陽(yáng)儀器有限公司客服咨詢。

多種應(yīng)用

由于GFP及其易用性，GFP等熒光蛋白已成為分子生物學(xué)的主流?？茖W(xué)家可以很容易地利用含有GFP的質(zhì)粒作為一種手段，達(dá)到許多功能目的，以下是一些常用的用途，但是目前還有許多其他的用途，并且新的GFP技術(shù)正在不斷發(fā)展！

融合標(biāo)記：GFP是最常見的用途之一，它可以與蛋白質(zhì)的N-或C-末端融合，這使科學(xué)家能夠可視化基因表達(dá)的時(shí)間和地點(diǎn)。

轉(zhuǎn)錄報(bào)告員：將GFP置于感興趣的啟動(dòng)子的控制下，可以用來(lái)有效地監(jiān)測(cè)特定細(xì)胞類型中啟動(dòng)子的基因表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄報(bào)告是GFP最早的應(yīng)用之一。

F?rster共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：這是用來(lái)研究?jī)蓚€(gè)蛋白質(zhì)之間的相互作用，或在兩個(gè)蛋白質(zhì)域之間發(fā)生構(gòu)象變化的相互作用。典型地，使用了兩種具有重疊激發(fā)/發(fā)射光譜的熒光蛋白；融合到每個(gè)正在測(cè)試的蛋白質(zhì)或域的一個(gè)。在這里找到微動(dòng)質(zhì)粒。

分裂EGFP：作為一種替代fet的方法，拆分EGFP也被用來(lái)研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用。在這種情況下，EGFP的兩部分融合到感興趣的蛋白質(zhì)中，當(dāng)它們接近時(shí)，EGFP的兩部分經(jīng)歷折疊、成熟和熒光。

生物傳感器：采用FRET、鈣調(diào)蛋白等多種策略，設(shè)計(jì)了一系列基于GFP的熒光生物傳感器，用于檢測(cè)各種細(xì)胞內(nèi)條件，包括離子（如Ca2+）濃度和pH等。

光遺傳學(xué)：科學(xué)家可以利用光來(lái)檢測(cè)、測(cè)量和控制分子信號(hào)、細(xì)胞和細(xì)胞群，以了解它們的活動(dòng)，并可視化改變對(duì)這種活動(dòng)的影響。了解更多關(guān)于光遺傳學(xué)的開放式光遺傳學(xué)，并在Addgene找到光致執(zhí)行器和傳感器。

細(xì)胞標(biāo)記/選擇：表達(dá)結(jié)構(gòu)如質(zhì)粒通常包括GFP作為標(biāo)記，以幫助識(shí)別哪些細(xì)胞成功地獲得了質(zhì)粒。這可以作為選擇抗生素的替代品。這種類型的質(zhì)?？赡茉诟信d趣基因的附加啟動(dòng)子的控制下，或與感興趣基因相同的轉(zhuǎn)錄子表達(dá)GFP，但在內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（IRES）之后。